Elektroforesia: zertarako, zertarako eta nola egiten den

Alai

• Zertarako balio du
• Nola egiten den
• Elektroforesi motak
• 1. Hemoglobinaren elektroforesia
• 2. Proteinen elektroforesia

Elektroforesia molekulak haien tamainaren eta karga elektrikoaren arabera bereizteko helburuarekin egindako laborategiko teknika da, gaixotasunen diagnostikoa egin, proteinen adierazpena egiaztatu edo mikroorganismoak identifikatu ahal izateko.

Elektroforesia prozedura sinple eta kostu txikikoa da, laborategiko errutinetan eta ikerketa proiektuetan erabiltzen dena. Elektroforesiaren xedearen arabera, diagnostikoa lortzeko beste proba eta azterketa batzuk egitea beharrezkoa izan daiteke.

Zertarako balio du

Elektroforesia hainbat helburuetarako egin daiteke, bai ikerketa proiektuetan bai diagnostikoan, teknika sinplea eta kostu baxukoa baita.Horrela, elektroforesia egin daiteke:

• Birusak, onddoak, bakterioak eta parasitoak identifikatzea, aplikazio hau ohikoagoa baita ikerketa proiektuetan;
• Aitatasun proba;
• Egiaztatu proteinen adierazpena;
• Mutazioak identifikatu, leuzemien diagnostikoan baliagarriak izanik, adibidez;
• Hemoglobina zirkulatzailearen motak aztertu, zelula faltsuen anemiaren diagnostikoan baliagarriak izanik;
• Odolean dauden proteina kopurua baloratu.

Elektroforesiaren xedearen arabera, beharrezkoa izango da medikuak diagnostikoa osatzeko beste proba osagarri batzuk egitea.

Nola egiten den

Elektroforesia egiteko beharrezkoa da gelaren helburua, poliakrilamidaz edo agarosaz egin daitekeelarik helburuaren arabera, elektroforesi buffer eta kubeta, pisu molekularreko markatzailea eta tindagai fluoreszentea, UV edo LED argi ekipamenduaz gain, transiluminatzaile gisa ere ezaguna. .

Gelak prestatu ondoren, objektu zehatz bat jarri behar da gelan dauden putzuak egiteko, jendez orrazia izenekoa, eta gelari uzten uzteko. Gel prest dagoenean, substantzia putzuetara aplikatu besterik ez duzu. Horretarako, pisu molekularreko markatzailea jarri behar da putzuetako batean, kontrol positiboa, hau da, zer den ezagutzen den substantzia, kontrol negatiboa, erreakzioaren baliozkotasuna bermatzen duena eta aztertu beharreko laginak. Lagin guztiak koloratzaile fluoreszente batekin nahastu behar dira, horrela transiluminadorearen bandak ikustea posible baita.

Laginak dituen gelak elektroforesi-ontzian jarri behar dira, bufferreko disoluzio espezifikoa duelarik, eta gero gailua piztu egiten da korronte elektrikoa eta, ondorioz, potentzial-aldea egon dadin, hau da, partikulen arabera bereizteko haien kargari eta tamainari. Iraupen elektroforetikoa prozeduraren xedearen arabera aldatzen da eta ordu 1 arte iraun dezake.

Zehaztutako denbora igarota, transiluminadorearen bidez egindako elektroforetaren emaitza ikus daiteke. Gelak UV edo LED argiaren azpian jartzen direnean, banden eredua ikusi daiteke: zenbat eta molekula handiagoa, orduan eta migrazio gutxiago egiten du putzura hurbilduz, molekula zenbat eta arinagoa izan, orduan eta migrazio potentzial handiagoa da.

Erreakzioa balioztatu ahal izateko, beharrezkoa da kontrol positiboaren bandak ikustea eta kontrol negatiboan ezer ez ikustea, bestela kutsadura egon zela adierazten baitu, eta prozesu osoa errepikatu behar delako.

Elektroforesi motak

Elektroforesia helburu desberdinetarako egin daiteke eta, horren xedearen arabera, hainbat gel mota erabil daitezke, ohikoenak poliakrilamida eta agarosa dira.

Mikroorganismoak identifikatzeko elektroforesia ohikoagoa da ikerketa laborategietan egitea; hala ere, diagnostikoetarako, elektroforesia proteina kopuruaren hazkundearekin batera garatzen diren gaixotasun hematologikoak eta gaixotasunak identifikatzeko erabil daiteke, elektroforesi mota nagusiak izanik:

1. Hemoglobinaren elektroforesia

Hemoglobinaren elektroforesia odolean zirkulatzen duten hemoglobina mota desberdinak identifikatzeko egiten den laborategiko teknika da, hemoglobinaren sintesiari lotutako gaixotasunen presentzia identifikatzea ahalbidetuz. Hemoglobina mota pH jakin bateko elektroforesiaren bidez identifikatzen da, idealki 8,0 eta 9,0 artean, eredu normalarekin alderatu daitezkeen banden eredua egiaztatzen da, hemoglobina anormalen presentzia identifikatzea ahalbidetuz.

Zertarako egina dago: Hemoglobinaren elektroforesia hemoglobinaren sintesiari lotutako gaixotasunak ikertu eta diagnostikatzeko egiten da, hala nola, igitai zelula anemia eta hemoglobina C gaixotasuna, talasemia bereizteko baliagarria izateaz gain. Ikasi hemoglobinaren elektroforesia interpretatzen.

2. Proteinen elektroforesia

Proteinen elektroforesia medikuak odolean zirkulatzen duten proteina kopurua ebaluatzeko eta, horrela, gaixotasunak identifikatzeko eskatzen duen azterketa da. Proba hau odol lagin batetik egiten da, eta hori zentrifugatu egiten da plasma lortzeko, odolaren zati hori, beste substantzia batzuen artean, proteinaz osatua.

Elektroforesiaren ondoren, banda eredu bat ikus daiteke eta, ondoren, proteina zati bakoitzaren kantitatea adierazten den grafikoa, diagnostikoa egiteko oinarrizkoa izanik.

Zertarako egina dago: Proteinen elektroforesiak medikuak mieloma anizkoitza, deshidratazioa, zirrosia, hantura, gibeleko gaixotasunak, pankreatitisa, lupusa eta hipertentsioa gerta litezkeen ikertzeko aukera ematen du banda ereduaren eta azterketaren txostenean agertzen den grafikoaren arabera.

Ulertu nola egiten den eta nola ulertu proteinen elektroforesiaren emaitza.